Yakagadziridzwa muna 1983, kushandiswa kwePCR kwakaita kuti zvive nyore kuita DNA kusarudzwa uye kuziva kurongeka kweiucleotides mumarudzi ega ega.
Iyo nzira inoshandisa kupisa mabhasikoro kana kudzokorora kunopisa uye kunotonhora kwezvinoitika kweDNA kusungunuka nekudzoka. Sezvo PCR ichienderera mberi, "DNA" itsva inoshandiswa sechinyorwa chekudzorera uye kushandiswa kweketani inoshandiswa, kujekesa kuwedzera DNA template.
Maitiro eCPR anoshandiswa munzvimbo dzakawanda dzebiotechnology kusanganisira mapuroteni engineering , cloning, forensics (DNA fingerprinting), kuongorora vana, kutarisa kwekuzvarwa uye / kana zvirwere zvinotapukira, uye yekuongorora zvidhori zvezvakatipoteredza.
Mukuongorora, kunyanya, PCR inonyanya kukosha nekuti inowedzera kunyange yakawanda kudarika kweDNA uchapupu. PCR inogonawo kushandiswa kuongorora DNA iyo zviuru zvemakore, uye nzira idzi dzakashandiswa kuzivisa zvinhu zvose kubva pamakore mazana mapfumbamwe emakore kusvika kumadzimai kubva kumativi ose enyika.
Purogiramu yePCR ndeyotevera:
- Pakutanga: Danho iri rinodikanwa chete kune DNA polymerases inoda kupisa-kutanga PCR. Izvo zvinopisa zvinopisa kusvika pakati pe 94 ne 96 ° C uye zvakabatwa kwemaminitsi 1-9.
- Denaturation: Kana nzira yacho isingadi kutanga, kuchenesa ndiyo danho rokutanga. Izvo zvinopisa zvinopisa kusvika 94-98 ° C kwemasekondi 20-30. DNA template hydrogen zvibatanidza zvinokanganiswa uye mahwendefa eDNA asina kukwana anogadzirwa.
- Annealing: Zvinoshandiswa kutengesa zvakaderera kusvika pakati pe50 ne65 ° C uye zvakachengetwa kwemaminitsi 20-40. Iko kunotanga kushandiswa kune DNA imwe yakanyanyiswa Datlate. Icho kutonhora kunokosha zvikuru panguva ino. Kana ichinyanya kupisa, primer haigoni kusunga. Kana ichitonhora zvikuru, iyo primer ingasunga isina kukwana. Chibvumirano chakanaka chinoumbwa apo kutarisa kwekutanga kunowirirana zvakaenzana nekatevedzana kwetemplate.
- Kuchengetedza / Kurongeka: Kupisa mukati mechito ichi chinopesana zvichienderana nehuwandu hwe polymerase. DNA polymerase inobatanidza DNA yakakwana zvachose.
- Kuguma kwekupedzisira: Danho iri rinowanikwa pa70-74 ° C kwemaminitsi mashanu kusvika ma15 kubva pakupedzisira kwePCR.
- Chibato chekupedzisira: Danho iri rinosarudza. Ichando ichichengetwa pa4-15 ° C uye strops zvinopindurwa.
Iyo nzira yakakamurwa kuva matanho matatu:
- Exponential amplification: Pakufamba kwega kwega, chigadzirwa (chidimbu chaDNA chinenge chichinyorwa) chakapetwa kaviri.
- Kusawirirana-kubva panhandare: Sezvo DNA polymerase inorasikirwa nebasa uye inopedza reagents, zvinopedzisira zvishoma.
- Plateau: Hapanazve chigadzirwa chinowedzera.